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农药残留速测仪测定方法
发布时间：[2019-11-20 14:37:55]
薄层酶抑制率法是农药残留速测仪测定果蔬农残的常用方法，牛肝酯酶和胰酵素可用于薄层-酶抑制技术检测有机氯农药。它是以抑制酸性或碱性磷酸酯酶为基础的。如以伞形酮磷酸酯作为基质时，即被酶分解为荧光化合物伞形酮而检出。紫外光的照射可明显增加这类农药的酶抑制能力，且某些有机氯农药对牛肝酯酶又比胰酶更灵敏些。
此外许多种农药在生物体外是弱的酶抑制剂，有时需转化为它们的氧化类同物或强的酶抑制物，以获得足够的抑制能力。用于转化的试剂有：冷的发烟硝酸、稀澳水、澳蒸气、澳替琥珀酰胺、紫外光、过氧化氢醋酸、过醋酸、间氯过苯甲酸、过氧化氢和氨水、氨蒸气等。转化适宜方法的选择，取决于测定方法、显色反应的类型和待测农药的性状。
研究表明，薄层适当地厚一些，由于为酶与基质的反应提供了比较充分的支持介质的关系，一般容易获得底色和农药斑在色泽上的较强反差，推荐的薄层厚度为350-500毫微米；使用酶液的量或浓度偏大，则有效活性质点数目过多，从而使抑制物被酯酶覆盖，某些基质分子亦被过量部分的酯酶所水解，致使斑点部位部分或全部为有色物质遮掩，因此，酶液的适用量和浓度，通常要根据具体情况，用实验来调整；同时由于基质与酶的反应，需要适宜的酸度，为此常用一定pH值的缓冲溶液来配制基质液。
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